Burbuja Seca Causada por
Verticillium
David M. Beyer, Paul J. Wuest, Jacquelyn J. Kremser
Translated by Carla Garzon
Este documento informativo ha sido diseñado para servir como una revisión
constructiva de la Burbuja Seca causada por Verticillium, la enfermedad de origen
fúngico más común de la seta comercial Agaricus bisporus. Un mejor
entendimiento de la biología del hongo que causa la burbuja seca puede ayudar a
los fungicultores a controlar esta enfermedad. Para algunos de ellos esta
enfermedad no es más que una pesadilla recurrente. Debido a la
dificultad para obtener nuevos o mantener anteriores pesticidas registrados,
parece que la batalla contra esta enfermedad continuará por muchos años.
El objetivo de esta hoja de datos es informar a los fungicultores sobre la
biología básica de esta enfermedad y proporcionar además alguna información
práctica.
Síntomas
Se ha descrito una variedad de síntomas para
esta enfermedad. La diversidad en la manifestación de síntomas se debe al
momento en que ocurre la infección con relación a los diferentes estadíos de
desarrollo del cultivo y a la cantidad de esporas que causan la infección
inicial. El estadío en el desarrollo del cultivo en el que ocurre la
infección, la cantidad de esporas que inician la infección y el tiempo que
transcurre desde el arribo de una espora hasta la aparición de síntomas, son
factores que parecen influenciar el tipo de síntoma que podemos encontrar.
Por tanto, reconocer todos los síntomas ayudará a determinar cuándo ocurrió la
infección inicial y esa información puede ser usada para controlar la
enfermedad. Se han escrito varias publicaciones que describen la relación
entre esporas y el desarrollo de enfermedad (Sinden, 1971; Gandy, 1973; North
and Wuest, 1993).
Burbuja
El síntoma más conspicuo encontrado ha sido
descrito como una masa de tejido fúngico en forma de globo, una burbuja seca
(Figura 1). Una seta sola o un racimo de setas puede convertirse en
una masa esférica de tejido que cubre toda el área infectada.
Ocasionalmente, conforme el tejido enfermo envejece, pueden aparecer unas pocas
gotas de líquido color ámbar. A menudo estas gotas causan confusión con
otra enfermedad fúngica, burbuja húmeda, causada por Mycogene sp.(Figura
2). Sin embargo, la diferencia está en que en la burbuja seca solo unas
pocas setas infectadas muestran las gotas color ámbar, y en aquellas que lo
hacen las gotas son muy pequeñas. La burbuja
húmeda se caracteriza por presentar gotas de color ámbar grandes y
numerosas que cubren la masa de tejido fúngico. La burbuja como síntoma
usualmente indica una infección severa y temprana del botón fúngico o incluso
anterior a que el botón sea visible. La infección temprana altera el
crecimiento del tejido fúngico evitando que se desarrolle hacia formas
diferenciales del pedicelo (estipe) y la sombrilla (pileo).
Figura 1. Seta infectada con Verticillium, exhibiendo el síntoma de la masa de tejido o burbuja seca.
Figura 2. Hongos infectados con
Mycogene sp. manifestando los síntomas de burbuja húmeda.
Estipe partido
Cuando la infección ocurre después que el
botón empieza a desarrollarse y el estipe esta infectado, éste se divide
conforme va madurando, causando un síntoma descrito como estipe partido o tallo
reventado, Figura 3. La infección evita el crecimiento del tallo en un lado del
hongo, mientras que el extremo sano continúa creciendo normalmente. El
extremo infectado del tejido se divide o rompe causando este síntoma
característico.
Figura 3.
Seta infectada con burbuja seca causada por Verticillium exhibiendo el
síntoma de tallo reventado.
Puntos necróticos
Este síntoma ha sido descrito como grandes
manchas de color café, con un tono gris difuso en el centro, Figura 4.
Estos puntos tienen normalmente un diámetro entre 0.7 y 1.8 cm. El área
gris que cubre estos puntos es tejido del patógeno esporulando y el área café
oscura ayuda a distinguirlo de la mancha bacteriana, que tiene un color más
claro y amarillento. Este síntoma usualmente se desarrolla cuando la
infección ocurre más tarde en el desarrollo del hongo, cuando los botones son
más grandes o cuando una pequeña infección puntual ocurre en la cabeza de una
seta.
Figura 4. Seta infectada con burbuja seca
causada por Verticillium exhibiendo puntos necróticos.
Moteado
Otro síntoma es la aparición de puntos cafés
del tamaño de la cabeza de un alfiler en la sombrilla de la seta. Este
síntoma es a menudo confundido con la formación de puntos a causa de otros
patógenos, tal como Trichoderma o a veces también con hoyos bacterianos,
Figura 5. Lo mas probable es que este síntoma aparezca cuando la
concentración de esporas es pequeña y la infección ocurre tarde en el proceso de
formación de botones.
Figura 5. Seta infectada con burbuja seca
causada por Verticillium exhibiendo moteado.
Ausencia de síntomas
Algunos investigadores han reportado que las
setas pueden carecer de síntomas en la cama de cultivo antes y al momento de la
cosecha, y la aparición de puntos ocurre más tarde. Es posible que estas
setas no sean aptos para la venta al momento en que llegan a los mercados, pero
lo más importante es que pueden diseminar esporas por toda la granja. Los
cosechadores pueden tocar las setas infectadas sin darse cuenta y transportar
esporas hacia áreas no infestadas.
El Organismo Causal
Patógeno (organismo que causa la
enfermedad): Verticillium fungicola (Preuss) Hassebrauk var. fungicola
Este hongo causa la enfermedad conocida como
burbuja seca en la seta comercial Agaricus bisporus.
Verticillium es además un patógeno de muchas setas silvestres. Por
tanto, es comúnmente encontrado alrededor de granjas durante temporadas de clima
cálido, cuando otras setas silvestres y mohos crecen, Figura 6. El método
más fácil para identificar a este patógeno es cultivarlo en un medio
selectivo. El medio selectivo ha sido desarrollado para permitir a
Verticillium que crezca más rápido que cualquier competidor. Los
detalles de cómo preparar este medio de cultivo estan en la publicación de
Rinker et al., 1993. Cuando Verticillium es cultivado en PDA
(potato-dextrose agar), a temperatura ambiental, las colonias son blancas y el
color del fondo de las placas es entre incoloro y amarillento. Algunos
cultivos pueden tener un perfil bajo con bordes redondeados y formando curvas.
Si uno puede medir las esporas debajo de un microscopio, estas deben medir 8-10
um de largo por 1-3 um de ancho y estrechándose hasta 0.5-1.0 um en la punta.
Desde el punto de vista de diseminación y control de enfermedades, el carácter
morfológico más importante es que las esporas son producidas en una matriz
gelatinosa. Este material gelatinoso recoge y mantiene muchas esporas
juntas. Este mismo material es el que pega las esporas a moscas, personas
y equipo. Esta gelatinosa masa de esporas es atraída fácilmente por
partículas de agua, lo que hace cualquier cosa que esté relacionado con agua sea
especialmente susceptible a diseminar esporas por la granja.
Figura 6. Vista microscópica del patógeno
fúngico Verticillium fungicola.
El hongo produce una tremenda cantidad de
esporas microscópicas, las cuales son invisibles a simple vista. Se
ha estimado conservadoramente que una seta infectada puede producir 30 millones
de esporas en una hora. También se ha reportado que toma tan solo 4 500
esporas por libra en caja para causar una perdida parcial y 45 millones de
esporas por libra en caja para no cosechar ninguna seta. Las esporas y el
micelio del hongo puede permanecer en condiciones secas por hasta seis meses y
puede sobrevivir durante los meses de invierno en el interior de las
instalaciones o debajo de desperdicios por toda la granja. Controlar la
diseminación de la enfermedad es como luchar contra un enemigo invisible.
Desarrollo de la enfermedad
Infestación temprana
La primera infestación con esporas de
Verticillium puede ocurrir tan temprano como al momento de poner la composta
en cajas, pero no antes. Generalmente las esporas que aterrizan en la composta
cuando ya esta colonizada por micelio no causan enfermedad. Se ha sugerido
que incluso esporas que están en la composta antes de empacarla no causan
enfermedad. Sin embargo, recientemente se ha comprobado que esporas
aplicadas en grandes cantidades en la composta antes de que sea empacada pueden
inducir el desarrollo de la enfermedad (Beyer y Kremser, no publicado).
Una vez que el encajonado es aplicado y los
rizomorfos empiezan a desarrollarse, aparentemente las esporas de
Verticillium se vuelven disponibles y agresivas alrededor del los nuevos
brotes. Las esporas ubicadas en la caja y en los brotes dentro de ella
germinan y la enfermedad se desarrolla.
Dispersión secundaria a través de vectores
Las esporas que causan burbuja seca se
pueden dispersar dentro de una casa de producción o de cultivo a cultivo.
El método más fácil y común de dispersión es a través de agua. Ha sido
demostrado que 60 gotas de agua sobre un mismo sitio salpican esporas a una
distancia de dos pies (Cross y Jacobs, 1969). Por tanto, regar con agua
setas ubicadas en el borde de una repisa salpicará esporas a la persona que las
está regando. Sin saberlo, esta persona puede diseminar las esporas a lo
largo de la cama de cultivo y a los otros cultivos que riegue ese día.
Las esporas son a menudo arrastradas en
partículas de polvo y gotitas de agua en el aire. No se necesitan grandes
gotas de agua para arrastras esporas. Una fina neblina, apenas
perceptible, seria suficiente para moverlas. Las partículas de polvo
funcionan como vectores casi de la misma manera, dado que las esporas se pegan a
ellas, y si se levantan del suelo pueden aterrizar sobre las cajas e infectar
los botones. El vapor de agua puede transportar esporas rápidamente
alrededor de un cuarto o granja. El lavado de los pisos, aunque es una
práctica higiénica recomendada, puede salpicar esporas del piso a las camas o
bandejas. Se sabe de epidemias causadas por el lavado excesivo de los
suelos en las casas de producción. Los cuartos y granjas se ven
inmaculados porque los cultivadores invierten muchas horas lavando los pisos con
mangueras o sistemas de lavado a presión. Desafortunadamente durante la
limpieza, salpicadura desde los pisos arrastran esporas hasta las camas, creando
serios problemas. Esto no sugiere que los cuartos deban ser mantenidos
sucios, pero sí que la limpieza debe hacerse con un sistema de agua a baja
presión o sin agua en absoluto. Una paleta limpia ventanas es la mejor
herramienta para limpiar desperdicios en un cuarto porque las escobas levantan
polvo y partículas que arrastran esporas.
Moscas sirven como portadoras de la
enfermedad y al controlar sus poblaciones se puede reducir la ocurrencia de
Verticillium. Algunas veces la enfermedad puede desarrollarse más
rápidamente con una infestación de nematodos. Esto no sugiere que los
nemátodos dispersan burbuja seca, pero ácaros araña roja, a menudo encontrados
en presencia de grandes poblaciones de nemátodos, recogen esporas y las mueven
alrededor de la cama de cultivo o del cuarto. Otros ácaros que se
alimentan de mohos en la composta pueden ser un problema. Eliminar la
fuente de alimento para estos arácnidos tiene muchas ventajas. El hongo
tendrá más alimento disponible, menos competencia, y los transportadores de
esporas serán eliminados. Los cultivadores pueden también dispersar la
enfermedad. Cada vez que entran a una casa con burbuja seca, muchas
esporas son recogidas y pueden ser transportadas a un cultivo nuevo. Por
tanto, los cultivadores deben ser concientes de su movimiento alrededor de la
granja, para minimizar el transporte de esporas. Los trabajadores que
monitorean la temperatura y aquellos que cubren las setas infectadas con sal o
alcohol son también potenciales portadores de la enfermedad. North y
Wuest (1993) han enfatizado la importancia de las setas “libres de síntomas” en
el desarrollo de esta enfermedad. No solo las setas que muestran síntomas
obvios pueden ser las potenciales fuentes de esporas; también pueden serlo
algunas setas que no desarrollan síntomas sino hasta después de la cosecha.
Estas setas “libres de síntomas” pueden acarrear esporas que pueden ser
dispersadas por cultivadores, cosechadores y otro personal.
Burbuja seca puede ser también un problema
en climas más fríos cuando la granja es invadida por ratones. Los roedores
viajan entre los cuartos escarvando en las camas para alimentarse de los
retoños. Ellos corren por el suelo recogiendo esporas y a menudo van
de los cultivos viejos a los nuevos.
Humedad relativa, temperatura y otros factores ambientales
Los factores ambientales en los cuartos van
a afectar la tasa de desarrollo de la enfermedad. El hongo Verticillium
gusta de condiciones abrigadas y húmedas para su crecimiento y reproducción.
Es posible que la humedad y la temperatura elevadas sean las responsables del
acelerado desarrollo y dispersión del hongo durante el verano.
Siempre se ha pensado que desde el momento en que una espora germina hasta que
los síntomas se desarrollan en las setas transcurren alrededor de 14 días.
Las cepas híbridas son generalmente cultivadas a temperaturas ligeramente
mayores y se pone más énfasis en mantener una más alta humedad relativa para
mejorar la su calidad. Por tanto, el tiempo de desarrollo de la enfermedad
es mucho más corto, talvez 7-10 días. En un ambiente más favorable, el
ciclo vital de Verticillium es más rápido lo que significa que habrá más
esporas producidas en un tiempo más corto. Por tanto, dependiendo de la
cantidad de enfermedad, podemos considerar un ligero compromiso del ambiente en
el cuarto para el desarrollo de Verticillium. Se ha reportado que
la manipulación de las condiciones ambientales en que se mantiene un cultivo
puede reducir el desarrollo de la enfermedad. Una reducción en la
temperatura del aire de 20°C (68°F) a 14°C (57°F) y de la humedad relativa de 90
a 80% por varios días reduce el porcentaje de setas infectadas (Nair y Macauley,
1986). Una reducción de estos parámetros puede frenar la germinación y el
crecimiento del patógeno, y tiene menos influencia en el crecimiento de las
setas. Sin embargo, en la práctica solo se puede conseguir esta
manipulación del ambiente si el tiempo hasta la cosecha no se ve afectado
negativamente. Es importante además tener control de estos cambios para
asegurarse que otras enfermedades, como la mancha bacteriana, no se conviertan
en problemas.
Monitoreo de la enfermedad
El primer paso en el control de la
enfermedad es una evaluación del cultivo para determinar cuándo aparece la
primera burbuja. La planificación del calendario de aplicación de funguicidas y
la localización de la fuente inicial de infección pueden ser conseguidas solo
con la determinación exacta de cuándo son vistos los primeros síntomas.
Los cosechadores deben ser entrenados para reconocer cómo se ven las setas
enfermas y deben alertar al fungicultor cuando las primeras setas sintomáticas
sean observadas. Algunas granjas hacen que los cosechadores coloquen un
palo o sorbete cerca de la burbuja, siendo extremadamente cuidadosos de no tocar
las setas enfermas o las setas alrededor de éstas. Usando este sistema de
marcación, el fingicultor sabrá cuándo aparece la enfermedad y entonces las
personas encargadas de salteado o del control de la enfermedad podrán encontrar
las setas enfermas para aplicar el tratamiento.
Desafortunadamente, esta enfermedad puede
escalar a una epidemia y entonces tomará semanas para que la carga de esporas
reduzca gradualmente en la granja y se pueda recuperar el control sobre la
enfermedad. Esta reducción en la carga de esporas alrededor de la granja y
en las casas de producción es un componente importante del control. Cómo
reducir esta carga de esporas es el problema. Primero, el o los vectores
que están dispersando las esporas deben ser identificados y eliminados.
Desde el momento del desarrollo del primer síntoma, el fungicultor debe revisar
quien o que estuvo en contacto con el cultivo alrededor de 10 a 14 días
antes; a temperaturas más cálidas y con mayor humedad en los cuartos
de cultivo, ese tiempo debe ser reducido a alrededor de 7 a 10 días. A
menudo, burbujas secas identificadas antes del primer brote indican que el
cultivo fue infestado por algo distinto al personal de cosecha o su equipo.
El cultivo puede ser protegido con cualquier
fungicida disponible u otras técnicas. No es necesario usar funguicidas
hasta después del encajonamiento. Los fungicidas disponibles en los
Estados Unidos son Benlate (Benomyl), Bravo (Chlorothalonil) y Mertect
(Thiabendazole). Bravo puede ser usado en estados donde éste tiene un
registro temporal en la sección 18 de la EPA. Cada año es más difícil
renovar este registro temporal en cada estado. La posibilidad de registrar
el complejo Prochloraz-manganesio (Sporgon) o Mancozeb (Dithane M-45) parece
sombría e, incluso en el caso de que sea posible, completar el registro de éste
y cualquier nuevo funguicida podría tomar años, a un alto costo. Cuando se
usan fungicidas, se recomienda rotar o alternar su aplicación. La rotación
de funguicidas puede ayudar a reducir el incremento progresivo de resistencia de
Verticillium a un solo producto. El calendario de aplicación de
fungicidas es crítico y por tanto es otra razón importante para determinar
exactamente cuando se observan los primeros síntomas. Es importante
asegurarse de que el fungicida cubra completamente el cultivo a la concentración
apropiada. Estos productos son costosos y por tanto el fumigador debe
asegurarse de alcanzar el centro de las camas así como las esquinas posteriores,
y alrededor de los bultos. Cuando se usa un desinfectante o baños de
cloruro para sumergir las boquillas de las mangueras o las herramientas, es
igualmente importante el mantener la concentración efectiva del químico.
Suciedad y materia orgánica en el tanque reduce la concentración efectiva del
ingrediente activo. Cualquier movimiento de agua o personal de los cuartos
antiguos a los nuevos, incluso durante pausas de descanso o para pedir
instrucción a un supervisor, debe ser suspendido.
Varias prácticas de cultivo pueden afectar
el desarrollo de la enfermedad. Se ha sugerido que un mayor crecimiento de
brotes en la superficie de las cajas al momento de recolectar botones está
relacionado con un incremento en la incidencia de la enfermedad. Este
fenómeno no sugiere que el fungicultor debe descartar el cultivo antes de lo
acostumbrado para controlar la enfermedad, pues esto resultaría en un excesivo
número de setas sucias. Sin embargo, evitar el excesivo crecimiento de los
brotes sobre la superficie puede ayudar a reducir la enfermedad. Además,
cepas que son más fáciles de recolectar pueden mostrarse menos sensibles que
cepas que son más difíciles de recolectar, porque más crecimiento vegetativo
ocurre sobre la superficie del cultivo que cuando se usa cepas “difíciles de
recolectar”.
No se puede insistir lo suficiente,
mantenga la granja limpia. Esto no solo inculca un buena mentalidad en
los empleados, ésto ademas elimina sustratos para el crecimiento de
Verticillium. Durante clima cálido y húmedo, la materia orgánica y
desechos de setas proveen un excelente hábitat para que Verticillium
crezca y produzca esporas rápidamente. Por tanto, las esporas no solo son
producidas en cultivos infectados, sino que esporas adicionales son generadas
alrededor de toda la granja.
Figura 7. Pila de sal cubriendo una
burbuja seca causada pro Verticillium.
Muchas granjas tienen una o más personas
designadas para buscar setas infectadas y cubrirlas con sal (Figura 7) o
rociarlas con alcohol. Esta técnica es más efectiva en los primeros brotes
de la enfermedad. No se debe tocar o remover la burbuja infectada.
Severos brotes de infección son difíciles de cubrir y normalmente es muy tarde
para un control efectivo. Dado que la carga de esporas es tan alta en esos
cuartos, el tráfico adicional alrededor de esos cultivos puede diseminar aún más
la enfermedad. Desafortunadamente cubrir setas que muestran síntomas no
previene la dispersión de esporas a partir de setas “libres de síntomas” u otras
fuentes de infección. El salteo o la eliminación de las burbujas debe
hacerse diariamente y debe tener 4 a 6 pulgadas en diámetro, cubriendo
completamente o rodeando la burbuja. Sal de mesa o en roca, HTH
pulverizado al 15% o alcohol al 80% pueden ser usados para cubrir o rociar las
áreas infectadas.
La boquillas de riego, el equipo de cosecha,
moscas, ácaros, roedores, personal de riego y sembradores son los medios de
transporte obvios para las esporas que diseminan la enfermedad. Todas las
piezas de equipo que entran en contacto con el cultivo después del
encajonamiento deben ser limpiadas a profundidad y desinfectadas. Si es
posible, para los cultivos nuevos o en cada cuarto, se debe usar una boquilla
diferente. Sumerja las boquillas en un baño desinfectante entre cuarto y
cuarto si tienen que ser compartidas.
Otros procedimientos importantes incluyen el
asegurarse de que el piso del cuarto alcance 60 °C (140°F) por varias horas
durante el pico de temperatura. A menudo la composta alcanza 60 °C (140°F)
antes que el piso o el área más fría del cuarto alcancen esa temperatura el
suficiente tiempo para asegurar la eliminación de esporas sobrevivientes.
Después de la colonización y en encajonamiento, lo pisos deben ser limpiados
para remover todos los pedazos de composta y encajonamiento con un fuerte
desinfectante o con una solución de cloruro. Es importante que el
desinfectante no llegue a la superficie de la composta o de las cajas.
Todas las herramientas y otro equipo que sea
llevado a la casa de cultivo en cualquier momento desde la colonización
del substrato hasta su desinfección mediante vapor debe ser desinfectada
profundamente. Todas las canastas de cosecha deben ser desinfectadas al
vapor o sumergidas en desinfectante después de cada uso y antes de regresar a
los cuartos para continuar la cosecha. Las esporas de Verticillium
y otras enfermedades pueden ser ser fácilmente acarreadas de regreso a las casas
de cultivo en estas canastas. Ningún químico debe ser usado en estas
canastas, a menos que sean enjuagadas completamente, para asegurarse de que
ningún residuo químico quede en las setas.
Manejo integrado de plagas (IPM)
El mejoramiento de otros problemas de
cultivo en la granja ayudará a reducir la dispersión de las esporas. Si la
preparación de la composta y la Fase II son adecuados, se reducirá mohos y
nemátodos, que sirven de alimento a los ácaros. Mantener la población de
moscas bajo control es una parte crítica del control. A veces, “mordemos
la bala” y desinfectamos al vapor los cultivos que están fuertemente infectados,
antes de una segunda recolección de botones. Este “dolor a corto plazo
para una ganancia a largo plazo” es solo efectivo si todos los otros aspectos de
un programa de control evitan que las esporas reinfecten los nuevos cultivos.
Hasta la fecha, todos los productos de
control biológico introducidos en la industria han fallado en controlar
adecuadamente esta enfermedad. La dificultad del uso de agentes biológicos
para esta enfermedad se puede deber a la incapacidad del agente de control
biológico de establecerse firmemente en el cultivo antes de que Verticillium
esté presente. A menudo, los agentes de control biológico requieren de una
cierta cantidad del patógeno para estar activos, de manera que el organismo de
control pueda sobrevivir.
Los resultados preliminares de algunas
investigaciones reciente han demostrado que el uso del substrato para setas
gastado (SMS, del inglés spent mushroom substrate) y procesado como material
para encajonamiento suprime el desarrollo de la enfermedad. El
procedimiento para preparar el material de encajonamiento no se ha desarrollado
comercialmente y el nivel de supresión de la enfermedad no justificó
económicamente el uso de este proceso. Mayor investigación se esta
realizando para identificar mecanismos de supresión que puedan estar activos en
el SMS. Sin embargo,algunos productos de control biológico son útiles en
el control de moscas, las cuales son vectores comunes de la enfermedad.
Estos productos serán discutidos en futuras publicaciones informativas.
El objetivo científico es aprender más
sobre el hongo patógeno. Necesitamos saber más sobre los requerimientos
nutricionales y ambientales de Verticillium y sobre el desarrollo de esta
enfermedad. Sabemos que la manipulación de las condiciones ambientales
tiene un efecto en el progreso de la enfermedad, pero también que resulta
difícil hacer esto y mantener el ciclo del cultivo y la calidad de las setas.
Hay otras prácticas que incentiven o que reduzcan el crecimiento de
Verticillium? Hay agentes de control biológico o compuestos que
podamos usar en contra de él? El estudio de esta enfermedad se debe
convertir en una prioridad para el éxito continuado del cultivo de setas.
Bonifacino, S.F. 1980. A Compendium of Major
Sporocarpic Diseases of the Commercial Mushroom Agaricus bisporus (Lange)
Imbach. M.A. Dept. of Plant Pathology, The Pennsylvania State University.
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